申貝科學儀器

目的

為保證(zheng)食品快(kuai)速檢測方法評價工作科學合理、標準(zhun)統一，特制定(ding)本規(gui)范。

適用范圍

本(ben)規范適用于食(shi)(shi)品(pin)藥品(pin)監(jian)管部(bu)門(men)組織開展的食(shi)(shi)品(pin)（含食(shi)(shi)用農產(chan)品(pin)）中農獸(shou)藥殘(can)留、非法添加、真(zhen)菌(jun)毒(du)素、食(shi)(shi)品(pin)添加劑、污(wu)染物質等定性快速(su)檢測方法及相關產(chan)品(pin)的技術評價。

評價指標

靈敏度

特異性

假陰性率和假陽性率

與參(can)比方法一致(zhi)性分(fen)析(xi)

評價方法

低檢出水平（檢出限）設置對(dui)于禁(jin)用物(wu)質或(huo)(huo)者(zhe)無(wu)殘留*的(de)物(wu)質應小(xiao)于或(huo)(huo)者(zhe)等于參比方法的(de)檢出限水平，對(dui)于存在(zai)國(guo)家標準限值(zhi)規定的(de)物(wu)質應小(xiao)于或(huo)(huo)等于限值(zhi)規定。所有參數(shu)需要在(zai)不(bu)同(tong)種類或(huo)(huo)者(zhe)類型的(de)食(shi)品中測定的(de)實際結果進行(xing)統(tong)計。

靈敏度

靈(ling)敏度是指方法(fa)在實驗條件下達到的實際低檢(jian)出(chu)水平時(shi)，檢(jian)出(chu)陽(yang)性結果的陽(yang)性樣品數占總(zong)陽(yang)性樣品數的百(bai)分比，具體計(ji)算要求(qiu)見(jian)附表，評(ping)價中可(ke)描述為(wei)該(gai)百(bai)分比下方法(fa)的檢(jian)出(chu)限。

特異性

特異性(xing)是指方法在實驗條(tiao)件下達到的(de)實際低檢出(chu)水平時，檢出(chu)陰性(xing)結果(guo)的(de)陰性(xing)樣品(pin)數占(zhan)總陰性(xing)樣品(pin)數的(de)百分比(bi)，具體計算要(yao)求見(jian)附表，評價中可(ke)描述為方法檢出(chu)限下不存在干擾(rao)的(de)百分比(bi)。

假陰性率和假陽性率

假陰性(xing)(xing)率(lv)是指方法在實(shi)驗條件下達到的(de)實(shi)際低檢出水平(ping)時，陽性(xing)(xing)樣品中(zhong)檢出陰性(xing)(xing)結(jie)果(guo)(guo)的(de)大(da)(da)概率(lv)（以百(bai)分比計），具體計算要求見附表，計算結(jie)果(guo)(guo)為方法大(da)(da)假陰性(xing)(xing)率(lv)的(de)結(jie)果(guo)(guo)。

 假(jia)陽性(xing)率(lv)(lv)是(shi)指方(fang)法(fa)在實(shi)驗條件下達到的(de)(de)實(shi)際低檢出水平(ping)時(shi)，陰(yin)性(xing)樣品(pin)中檢出陽性(xing)結果的(de)(de)大(da)(da)概率(lv)(lv)（以百分比計），具(ju)體計算(suan)要求(qiu)見附表，計算(suan)結果為方(fang)法(fa)大(da)(da)假(jia)陽性(xing)率(lv)(lv)的(de)(de)結果。

與參比方(fang)法(fa)一致性分析

快(kuai)速檢測方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)應與方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)中規定的(de)參比(bi)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)進(jin)行(xing)一(yi)(yi)致性(xing)比(bi)較。與參比(bi)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)一(yi)(yi)致性(xing)分析統計方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)常見卡方(fang)(fang)檢驗，具體可見附(fu)表中顯著性(xing)差異（c²）所示(shi)，一般：

c²=（½a-b½-1）²/（a+b）

a：樣品被待確認方法(fa)證實為陽性而參(can)比方法(fa)檢驗為陰性的數目；

b：樣品(pin)被(bei)待確認(ren)方(fang)法(fa)證實(shi)為陰性(xing)而(er)參比方(fang)法(fa)檢驗為陽(yang)性(xing)的數目。

c²<3.84表示待確認方法與參比方法的陽性確證比率在95%的置信區(qu)間內沒有顯著性(xing)差(cha)異。但是(shi)如果待確認方法比參比方法存在更(geng)高的回(hui)收率，則以(yi)上兩(liang)種方法的陽(yang)性(xing)確證(zheng)比率存在顯著性(xing)差(cha)異是(shi)可以(yi)接受的。

c²>3.84表示兩種方法的陽性確認比率在95%的置(zhi)信區間內(nei)有(you)顯著性差異。

如果能夠證實(shi)待(dai)確(que)認方(fang)法靈敏度優(you)于參(can)比方(fang)法，則(ze)兩種陽性比例的顯著性差(cha)異可以接受(shou)。

在考察(cha)與參比方法的一致性分析(xi)中，也需要考察(cha)在檢出限或(huo)者報告限度(du)(du)水平(ping)附近的檢測結(jie)果(guo)與濃度(du)(du)之(zhi)間的趨(qu)勢(shi)一致性。

5　評價步驟

5.1　擬定評價技術方案

在比(bi)較(jiao)快速檢(jian)測方(fang)(fang)法(fa)與待評(ping)(ping)價(jia)方(fang)(fang)法(fa)的(de)適用范圍(wei)、性(xing)能指標(biao)(biao)和(he)要(yao)求等(deng)符合(he)性(xing)情況(kuang)的(de)基礎上，評(ping)(ping)價(jia)機(ji)構應(ying)針對(dui)待評(ping)(ping)價(jia)食品快速檢(jian)測方(fang)(fang)法(fa)及(ji)相關產品制(zhi)定(ding)評(ping)(ping)價(jia)方(fang)(fang)案。應(ying)包(bao)括但不(bu)限(xian)(xian)于：方(fang)(fang)案實施程序、評(ping)(ping)價(jia)內容(rong)及(ji)依(yi)(yi)據(ju)、評(ping)(ping)價(jia)比(bi)較(jiao)用參(can)考(kao)(kao)限(xian)(xian)值(zhi)標(biao)(biao)準及(ji)方(fang)(fang)法(fa)標(biao)(biao)準、參(can)考(kao)(kao)樣(yang)品制(zhi)備、參(can)考(kao)(kao)值(zhi)選擇、參(can)考(kao)(kao)樣(yang)品定(ding)值(zhi)及(ji)依(yi)(yi)據(ju)、參(can)考(kao)(kao)樣(yang)品編碼及(ji)說明(ming)、測試(shi)程序、結(jie)果判斷及(ji)統計方(fang)(fang)式、結(jie)論出具等(deng)，終結(jie)論的(de)出具應(ying)附相關判別依(yi)(yi)據(ju)，并(bing)給(gei)出相應(ying)判別指標(biao)(biao)。

盲樣制備

試驗評價需使用盲樣檢測進行。試驗評價盲樣涉及空白、陰性、陽性樣品等均應進行實驗室測定賦值，并出具均勻性和穩定性結果，相應盲樣的均勻性和穩定性測試結果計算的重復性相對標準偏差，應為參比方法要求對應濃度應符合重復性相對標準偏差的1/3。可(ke)(ke)使用(yong)有證標準物(wu)質(zhi)、參考(kao)物(wu)質(zhi)或(huo)者(zhe)質(zhi)量(liang)控制(zhi)品(pin)等(deng)進行(xing)(xing)溯源參考(kao)，測定完成(cheng)后的(de)(de)各類(lei)樣(yang)(yang)品(pin)應(ying)進行(xing)(xing)隨機編號處理，形成(cheng)盲(mang)樣(yang)(yang)。用(yong)于試(shi)驗評價的(de)(de)盲(mang)樣(yang)(yang)或(huo)者(zhe)質(zhi)量(liang)控制(zhi)樣(yang)(yang)品(pin)，可(ke)(ke)自行(xing)(xing)制(zhi)備，應(ying)符(fu)合：

1)基(ji)質(zhi)符合性和與實際食品樣品所含物質(zhi)成分相似性；

2)考慮成分存在的濃(nong)度水(shui)(shui)(shui)平(ping)，應涵蓋(gai)涉及(ji)產(chan)品的檢(jian)出(chu)水(shui)(shui)(shui)平(ping)、標準*值(zhi)（標準規定值(zhi)）、對(dui)應標準的檢(jian)出(chu)水(shui)(shui)(shui)平(ping)等，選擇多(duo)個水(shui)(shui)(shui)平(ping)進行測定；

3) 根據標準方法規定(ding)的(de)食(shi)(shi)(shi)品(pin)類(lei)別或者(zhe)評(ping)價范圍適用的(de)食(shi)(shi)(shi)品(pin)，盲樣制備(bei)時應重點考慮典型(xing)樣品(pin)基(ji)質或相似基(ji)質，結合(he)相關食(shi)(shi)(shi)品(pin)類(lei)別和測定(ding)目(mu)標物存(cun)在形式，按(an)照食(shi)(shi)(shi)品(pin)宏觀組分(fen)(fen)進行(xing)區分(fen)(fen)，綜(zong)合(he)考慮蛋白、脂肪、水分(fen)(fen)、糖分(fen)(fen)、高聚(ju)物或者(zhe)多(duo)聚(ju)體(ti)物質、色澤、酸堿性等影響檢(jian)測的(de)組分(fen)(fen)進行(xing)區分(fen)(fen)選(xuan)擇，必要(yao)時應按(an)照食(shi)(shi)(shi)品(pin)生產工藝(yi)制備(bei)添加樣品(pin)；

4)對于(yu)(yu)多種成(cheng)分(fen)檢測，應選擇其分(fen)析成(cheng)分(fen)進行分(fen)類(lei)(lei)比較(jiao)（結構(gou)類(lei)(lei)似程(cheng)度、危害程(cheng)度等），綜合選擇幾(ji)種代表性(xing)成(cheng)分(fen)進行評價；對于(yu)(yu)易(yi)于(yu)(yu)獲得的成(cheng)分(fen)組合，盡可(ke)能考慮全部進行試(shi)驗評價；

5)盲(mang)樣(yang)測(ce)定(ding)(ding)方式按照單位(wei)樣(yang)品(pin)(pin)量以(yi)(yi)及添加目(mu)標物的情況，樣(yang)品(pin)(pin)處(chu)理可以(yi)(yi)采用(yong)部分樣(yang)品(pin)(pin)、全量處(chu)理等方式進(jin)(jin)行(xing)。盲(mang)樣(yang)必須進(jin)(jin)行(xing)批內均(jun)勻性檢(jian)(jian)查，對于一定(ding)(ding)時間范圍內檢(jian)(jian)測(ce)的樣(yang)品(pin)(pin)，需(xu)要進(jin)(jin)行(xing)穩定(ding)(ding)性檢(jian)(jian)查，保證在(zai)評(ping)價(jia)期限內樣(yang)品(pin)(pin)穩定(ding)(ding)，以(yi)(yi)上均(jun)需(xu)評(ping)價(jia)機(ji)構提供檢(jian)(jian)測(ce)報(bao)告。

5.3　試驗測試

5.3.1 試驗評價(jia)(jia)可(ke)按照(zhao)(zhao)方(fang)(fang)(fang)法前期驗證結果(guo)（如有），進行(xing)濃(nong)度(du)水平(ping)和基質設(she)計，應(ying)比較空白檢測、對(dui)照(zhao)(zhao)檢測、標(biao)準方(fang)(fang)(fang)法平(ping)行(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)檢測等(deng)內容，附帶(dai)考察方(fang)(fang)(fang)法操作環境、方(fang)(fang)(fang)法用時、操作難(nan)易等(deng)情況；對(dui)于多檢測規格(ge)產(chan)品，應(ying)根據其實際規格(ge)制(zhi)定具體評價(jia)(jia)濃(nong)度(du)范(fan)(fan)圍和水平(ping)，并在結果(guo)判斷中(zhong)注明適用檢測范(fan)(fan)圍。

5.3.2 評(ping)價應進行雙(shuang)盲檢(jian)測(ce)(ce)，對待評(ping)價食(shi)品(pin)快(kuai)速檢(jian)測(ce)(ce)方法(fa)和(he)用于比較的參比方法(fa)平行利用盲樣(yang)(yang)進行測(ce)(ce)試(shi)，并(bing)對樣(yang)(yang)品(pin)進行平行測(ce)(ce)定，分別計算獲得(de)平均(jun)檢(jian)測(ce)(ce)結果，用于方法(fa)間一致性評(ping)價，檢(jian)測(ce)(ce)過程(cheng)中(zhong)(zhong)應利用根據檢(jian)測(ce)(ce)物(wu)在食(shi)品(pin)中(zhong)(zhong)實際可(ke)能存在的水平，設置質量控制(zhi)樣(yang)(yang)品(pin)，考察檢(jian)測(ce)(ce)穩(wen)定性。實驗中(zhong)(zhong)測(ce)(ce)試(shi)樣(yang)(yang)品(pin)包括但不限于：

1) 食品基質空白樣品；

2) 測試水平一般應包括標準方法檢出水平（或者標準*值）的0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區分的水平（不少于3個）；或者方法標稱檢出限0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區分的水平（不少于3個）；

3) 依據相關分析檢測統計計量要求，一般檢測樣品每種基質空白及每個濃度水平不得少于50例，對于非法添加等重點項目的檢測，可考慮在低濃度水平設置為100例(li)，以便更好(hao)地評價出假陽(yang)性率(lv)和(he)假陰性率(lv)；

4) 如存在或易獲得(de)，應進行陽性樣品(pin)復核測試；

5) 針對(dui)多成分方法，每種(zhong)典型物質均需有檢測結(jie)果和(he)相應(ying)評價參數結(jie)果；

6) 應給出(chu)差(cha)異(yi)比較(jiao)結果，具備數值的應有統計識(shi)別結論，統計方(fang)法可根據實際情況進行設定，但需說(shuo)明(ming)理(li)由。

評價結果及報告出具

評價結果

評價結果應計算快速檢測方法可檢出限度水平的靈敏度、特異性、假陰性率、假陽性率以及檢測結果與參與方法的一致性。一般可考慮（但不限定）每個基質每個濃度水平應在數據采集數不少于50例情(qing)況下，獲得假(jia)陰性率(lv)(lv)和假(jia)陽性率(lv)(lv)的結果。食品快速檢測(ce)方(fang)法(fa)技(ji)術評(ping)價機構應(ying)根據項目實際情(qing)況給(gei)出上述指標(biao)評(ping)價結果，并提(ti)供具有統計意義的說明。

報告出具

**技(ji)術(shu)評(ping)價機構應出具技(ji)術(shu)評(ping)價報告(gao)，對評(ping)價整(zheng)體情況和結(jie)果進(jin)行匯總整(zheng)理和分析(xi)，報告(gao)中應有(you)被(bei)評(ping)價的(de)(de)食品(pin)快速檢測方法(fa)或(huo)相關產品(pin)是否符合國家(jia)有(you)關規定或(huo)產品(pin)標稱的(de)(de)結(jie)論。

附表：快速檢測方法性能指(zhi)標計算表

附表

快速(su)檢測方法性能(neng)指標(biao)計算表